Упоминание «смиренного игумена Сергия» некоторые исследователи связывают с именем преподобного Сергия Радонежского. Вполне вероятно, что Преподобный и дал свое благословение на рукописное Евангелие для Дудина монастыря в 1365 году, во время своего путешествия в Нижний Новгород.

Так или иначе, основание Дудина монастыря можно отнести ко второй половине XIVстолетия, когда на нижегородской земле возникали и развивались первые монашеские обители. По-видимому, первым строителем этого иноческого общежития был некий инок Амвросий, чье имя и сохранилось в названии монастыря.

Церковное предание гласит и о том, что основание Дудина монастыря было связано с явлением на этoм месте иконы святителя Николая Чудотворца.

Как и большинство русских монашеских обителей, с начала XVI века Дудин монастырь вел разностороннюю хозяйственную деятельность. Это связанно с тем, что обычным явлением было крупное монастырское землевладение.
По описанию, сделанному архимандритом Макарием (Миролюбовым) в середине XIX столетия, среди древних хозяйственных актов в монастырской ризнице хранились многочисленные жалованные грамоты. Самым древним документом являлась грамота царя Иоанна Васильевича Грозного (1560 г.). Существовали также гpaмоты Федора Иоанновича (1586 г.), Михаила Федоровича (1614, 1626, 1630 гг.), Фeдopa Алексеевича (1681 г.), Петра Великого (1697 г.) и другие. В общей сложности насчитывалось 67 государственных актов, подтверждающих владение монастыря рыбными угодьями на Оке, сенными покосами, солеными варницами в Балахне, лесными угодьями и крепостными крестьянами. Наряду с царскими грамотами Дудин монастырь имел на свои владения и патриаршие грамоты: от Иова (1602 г.), Филарета (1620 г. и 1626 г.) и Адриана (1691 г.).

Большинство монастырских угодий находилось в Нижегородском yeзде, но были также вотчины в Ядринском и Алатырском уездах, на территории современной Чувашии. Как свидетельствуют хозяйственные акты XVI столетия, Дудину монастыpю на тот период времени принадлежали окрестные деревни: Тетерюгино, Болотец, Польцо, Дубенки, Тредворцы, Ченцово и другие (всего 14 поселений), а также множество лесных заимок и бортных угодий. Расширял монастырь и свою промысловую деятельность, занимаясь ловлей рыбы на пожалованных ему речных угодьях на Оке и озерах.

При обители возникает торговая свобода, где монахи продавали излишки рыбы и других съестных припасов. Наряду с этим реализовывались различные товары и в Нижнем Новгороде, где у иноков в XVII веке имелось семь торговых лавок, один амбар и четыре постоялых двора. Тогда же монастырь приобретает в Балахне соляную варницу и начинает торговать солью.